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標(biāo)題: 蝦類消化道菌群研究進(jìn)展 [打印本頁]

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2012-8-23 15:21
標(biāo)題: 蝦類消化道菌群研究進(jìn)展
本帖最后由 cjlittlepig 于 2012-8-23 15:22 編輯

摘自《中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)》

摘要: 蝦類消化道內(nèi)生活著大量的細(xì)菌，它們成為蝦體內(nèi)不可或缺的重要組成部分，影響著機(jī)體的生長(zhǎng)與健康。文章綜述蝦類消化道菌群的來源、組成以及作用。這些細(xì)菌主要來源于水體和食物中，常見的優(yōu)勢(shì)菌主要有發(fā)光桿菌屬、弧菌屬、氣單胞菌屬、假單胞菌屬等。消化道菌群既可以為宿主提供營(yíng)養(yǎng)、輔助消化，又能夠拮抗病原、影響宿主的健康。它們的組成與變化既與蝦類自身的種類、發(fā)育時(shí)期以及健康狀況等因素有關(guān)，也受到包括水環(huán)境的鹽度、溫度、氧氣濃度、餌料和藥物等因素的影響。

關(guān)鍵詞: 蝦類；消化道菌群；影響因素；作用

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2012-8-23 15:23

微生態(tài)學(xué)是在微觀層次上研究宿主體內(nèi)微生物(細(xì)菌) 類群及其相互關(guān)系的科學(xué)[1]。目前，人類及其它陸生動(dòng)物的微生態(tài)學(xué)研究已取得令人振奮的成果。水生動(dòng)物的腸道內(nèi)同樣寄生著大量的微生物，它們形成了1個(gè)微生態(tài)系統(tǒng)，影響著機(jī)體的生長(zhǎng)與健康。由于水環(huán)境的特殊性，水生生物消化道內(nèi)微生物受周圍水環(huán)境中微生物的影響較大，無法像陸生動(dòng)物的腸道微生物那樣長(zhǎng)期定居，并且容易隨溫度、鹽度等外界環(huán)境的變化而發(fā)生改變[2- 3]。因此，研究水生動(dòng)物的消化道菌群與宿主及水環(huán)境的關(guān)系顯的尤為重要，本文就蝦類這一重要的水生經(jīng)濟(jì)種類的消化道菌群研究概況做一綜述。

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2012-8-23 15:24

1 蝦類消化道菌群的來源與組成
人及陸生動(dòng)物的胚胎發(fā)育是在體內(nèi)進(jìn)行的，而蝦類動(dòng)物幼體的早期發(fā)育則在外界環(huán)境中進(jìn)行。在水環(huán)境中，各種微生物可以獨(dú)立存活，而且可以達(dá)到很高的濃度[4]。在消化道中出現(xiàn)的細(xì)菌通常是那些從環(huán)境或食物中獲得并能在消化道中存活和繁殖的。李筠等[5]用無菌水清洗幼體表面，在健康的受精卵和無節(jié)幼體內(nèi)沒有檢測(cè)到細(xì)菌，從狀幼體開始攝食后，體內(nèi)才出現(xiàn)細(xì)菌，可見對(duì)蝦體內(nèi)的細(xì)菌主要是由口而入的。尤其是在幼體階段，蝦類是濾食性的，周圍的細(xì)菌會(huì)不斷的被吸入體內(nèi)，進(jìn)而在體內(nèi)定植繁衍。楊鶯鶯等[6]對(duì)人工飼料飼養(yǎng)的凡納濱對(duì)蝦成蝦腸道菌群組成及其水體細(xì)菌區(qū)系組成進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)弧菌屬、希瓦氏菌屬、芽孢桿菌屬等細(xì)菌既是對(duì)蝦腸道菌群的主要組成，同時(shí)也是水體菌群的主要組成。Moriarty[7]研究也發(fā)現(xiàn)在日本對(duì)蝦的腸道和海水中具有相同的細(xì)菌，這似乎不能看成簡(jiǎn)單的巧合，水體中的細(xì)菌組成與蝦類腸道內(nèi)定植的細(xì)菌群( 尤其是常駐菌群) 有著必然的聯(lián)系。當(dāng)然，消化道中的細(xì)菌組成與水體或者食物中的細(xì)菌組成也不是完全一致，因?yàn)椴⒎撬械募?xì)菌進(jìn)入消化道后都可以定植、存活。由于不同的細(xì)菌對(duì)消化道內(nèi)的環(huán)境適應(yīng)能力不同而且存在種間競(jìng)爭(zhēng)排斥作用，這導(dǎo)致只有少數(shù)細(xì)菌得以在一定時(shí)間內(nèi)定植于消化道中，而多數(shù)細(xì)菌則被淘汰掉。
蝦類消化道菌群的組成受多種因素的影響，不同種類、不同階段或者不同生長(zhǎng)環(huán)境的蝦類之間既有其共性，也有差異性。Dempsey 等[8]對(duì)蝦類的腸道菌群進(jìn)行了研究，分離并鑒定了腸道菌群的好氧菌，發(fā)現(xiàn)弧菌屬、產(chǎn)堿菌屬、氣單胞菌屬、發(fā)光桿菌屬和假單胞菌屬占優(yōu)勢(shì)。Yasuda 等[9]發(fā)現(xiàn)日本對(duì)蝦幼蝦中弧菌占優(yōu)勢(shì)，而成年蝦中假單胞菌占優(yōu)勢(shì)。王祥紅等[10]對(duì)野生健康對(duì)蝦成蝦腸道微生物區(qū)系進(jìn)行了研究，從腸道中分離出47 株菌，他們分別隸屬于8 個(gè)屬，其中弧菌屬和發(fā)光桿菌屬在整個(gè)腸道中為優(yōu)勢(shì)菌屬。宛立等[11]對(duì)健康的凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)需氧菌群進(jìn)行研究，共分離到111 株菌，分屬于13 個(gè)屬，其中優(yōu)勢(shì)菌為發(fā)光桿菌屬、弧菌屬、氣單胞菌屬、腸桿菌屬、黃單胞菌屬。李卓佳等[12]應(yīng)用Biolog 方法和傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法分析比較了施用有益菌和沒有施用有益菌的對(duì)蝦腸道菌群結(jié)構(gòu)，其優(yōu)勢(shì)菌分別為弧菌屬、發(fā)光桿菌屬和假單胞菌屬、弧菌屬。Moss 等[13]分析比較了2種不同水源( 井水和池塘水) 對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道菌的影響，池塘水組的對(duì)蝦腸道菌群主要包括弧菌、氣單胞菌、假單胞菌和黃桿菌，井水組的腸道菌群豐度低于池塘水組，在整個(gè)養(yǎng)殖過程中未出現(xiàn)假單胞菌和黃桿菌。盡管蝦類消化道中的優(yōu)勢(shì)菌種不盡相同，發(fā)光桿菌屬、弧菌屬、氣單胞菌屬、假單胞菌屬等為蝦類消化道中的常見優(yōu)勢(shì)菌。

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2012-8-23 15:25

2 蝦類消化道菌群的作用

蝦類消化道內(nèi)的細(xì)菌(尤其是常駐菌群) 與宿主之間相互影響相互作用，已成為蝦體內(nèi)不可或缺的重要組成部分。消化道菌群可以促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)代謝，影響宿主健康。

2. 1 提供營(yíng)養(yǎng)、輔助消化作用

消化道細(xì)菌生活在蝦類消化道內(nèi)，需依賴蝦體自身營(yíng)養(yǎng)或分解蝦類的食物團(tuán)而賴以生存；同時(shí)，細(xì)菌以及細(xì)菌在代謝過程中合成分泌的維生素及其它胞外酶產(chǎn)物也可以被蝦類利用，在蝦類的營(yíng)養(yǎng)、消化吸收方面起重要的作用。Kimiaki 等[14]研究指出，細(xì)菌可以作為蝦類幼體的食物來源，提供幼體生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。Hamid 等[15]的研究表明弧菌和腸桿菌產(chǎn)生蛋白酶、淀粉酶，幾丁質(zhì)酶和卵磷脂酶，參與碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)等重要營(yíng)養(yǎng)素的消化。消化道菌群分泌的胞外酶，彌補(bǔ)了內(nèi)源酶分泌量的不足，這對(duì)于消化系統(tǒng)發(fā)育尚不完全的幼體來說可能更為重要。此外，消化道菌群分泌的各種活性物質(zhì)，如一些維生素、必需氨基酸、高度不飽和脂肪酸等，也可以被生物體利用[16-17]。通過投喂一些種類的有益菌，可以有效促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)和餌料利用。在飼料中添加芽孢桿菌能夠促進(jìn)凡納濱對(duì)蝦對(duì)飼料的消化吸收，提高飼料中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率[18]。在無菌環(huán)境下生長(zhǎng)的鹵蟲，向水體中添加非致病菌可以顯著促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育[19]。

2. 2 影響宿主健康、拮抗病原菌作用

消化道中的菌群在維持宿主健康方面具有重要的作用，各種細(xì)菌共同生存在消化道內(nèi)，組成了一個(gè)處于動(dòng)態(tài)平衡的菌群系統(tǒng)。正常的菌群系統(tǒng)構(gòu)成的機(jī)體防御屏障包括化學(xué)屏障和生物屏障二方面。化學(xué)屏障是指腸內(nèi)主要菌群的代謝產(chǎn)物例如乙酸、乳酸、丙酸、過氧化氫及細(xì)菌素等活性物質(zhì)，可阻止或殺滅病原微生物在體內(nèi)的定植。生物屏障是指定植于粘膜或皮膚上皮細(xì)胞之間的正常菌群所形成的生物膜樣結(jié)構(gòu)，通過定植保護(hù)作用影響過路菌或外來致病菌的定植、占位、生長(zhǎng)和繁殖[20]。腸道菌群組成與病害發(fā)生具有一定的聯(lián)系。腸道菌群多樣性降低，尤其是哈維氏弧菌、鯊魚弧菌等成為優(yōu)勢(shì)弧菌時(shí)，對(duì)蝦容易爆發(fā)疾病[21]。李筠等[5]發(fā)現(xiàn)，溶藻膠弧菌總是在蝦幼體健康時(shí)出現(xiàn)或成為優(yōu)勢(shì)，而哈維氏弧菌成為優(yōu)勢(shì)時(shí)，苗期病害容易發(fā)生。有些菌類( 如弧菌、發(fā)光桿菌等) 是腸道正常菌群的一員，它們保持一定的數(shù)量，對(duì)腸道中的碳源代謝利用是有很大的幫助的，但是當(dāng)某種原因?qū)е缕浯罅糠敝常淙郝浯x活動(dòng)就會(huì)受到抑制，從而影響對(duì)蝦健康[22]。細(xì)菌性疾病一直困擾著對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，為解決這一問題，需要對(duì)健康養(yǎng)殖動(dòng)物的細(xì)菌學(xué)知識(shí)有更全面的了解，以便能夠效仿這種條件，有效地解決生產(chǎn)中出現(xiàn)的問題[23]。近些年來，許多學(xué)者對(duì)凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)的正常菌群進(jìn)行分析，并試圖從中分離一些有益生物[24]。Daniels 等[25]在厄瓜多爾的養(yǎng)殖水體中發(fā)現(xiàn)溶藻膠弧菌可抑制凡納濱對(duì)蝦的病原菌- 副溶血弧菌，提高幼體的生長(zhǎng)和成活率；此菌還可控制溞狀綜合癥的發(fā)生，作者認(rèn)為溶藻膠弧菌比病原菌生長(zhǎng)快，可優(yōu)先占據(jù)對(duì)蝦消化道，阻止病原菌的侵染。Gullian 等[26]從對(duì)蝦肝胰臟中分離到三株有益菌，它們能夠競(jìng)爭(zhēng)排斥哈維氏弧菌，減少該菌在對(duì)蝦肝胰臟中的定植，其中一株有益菌還可以提高對(duì)蝦的免疫能力。

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2012-8-23 15:27

3 影響蝦類消化道菌群的因素

蝦類消化道菌群組成與變化既與蝦類自身的種類、發(fā)育時(shí)期以及健康狀況等因素有關(guān)，也受到包括水環(huán)境的鹽度、溫度、氧氣濃度、餌料和藥物等因素的影響。蝦類消化道菌群的形成、發(fā)展、變化受到這些因素的制約，只有適宜的細(xì)菌在適宜的條件下進(jìn)入消化道內(nèi)才能夠增殖[7]。

3. 1 蝦類自身影響因素

在蝦類消化道中，菌群組成及數(shù)量變化隨個(gè)體的不同發(fā)育階段而異。李筠等[5]研究了育苗期間中國(guó)對(duì)蝦幼體菌群的變化，狀幼體1~ 2期最易分離到的為假單胞菌和氣單胞菌，沒有分離到弧菌。狀幼體3期假單胞菌、氣單胞菌仍占優(yōu)勢(shì)，此時(shí)弧菌開始出現(xiàn)，但不占優(yōu)勢(shì)；從狀幼體3期后至仔蝦5~ 6期，弧菌明顯占優(yōu)勢(shì)。并且發(fā)現(xiàn)，溶藻膠弧菌總是出現(xiàn)于狀幼體3 期至糠蝦3 期，且在此期間成為優(yōu)勢(shì)菌，而哈維氏弧菌總是在糠蝦3 期~ 仔蝦5 期出現(xiàn)，并在此期間取代溶藻膠弧菌而成為優(yōu)勢(shì)菌。這與Yasuda 等對(duì)日本對(duì)蝦幼體的研究結(jié)果相一致[9]。宛立等[11]對(duì)健康養(yǎng)殖的凡納濱對(duì)蝦腸道菌群做了調(diào)查研究，分別于7月15 日、8 月14 日、9 月22 日取樣，結(jié)果在7 月15 日取樣檢測(cè)到的細(xì)菌種類多于后兩次取樣，幾乎包括了后兩次樣品中檢測(cè)到的所有菌屬，并且其優(yōu)勢(shì)菌屬也發(fā)生了變化。這可能是因?yàn)殡S著腸道的發(fā)育，細(xì)菌生長(zhǎng)的腸道環(huán)境發(fā)生變化，許多菌屬不適宜腸道環(huán)境被淘汰的結(jié)果。Oxley 等[27]也認(rèn)為隨著蝦類個(gè)體的發(fā)育，其腸道本身對(duì)于細(xì)菌區(qū)系影響增大，對(duì)野生和養(yǎng)殖的墨吉對(duì)蝦成蝦腸道微生物區(qū)系分析發(fā)現(xiàn)，盡管它們來自差異很大的環(huán)境，但是在腸道細(xì)菌群落組成上卻可以高度相似。

菌群在蝦類體內(nèi)的分布具有一定的差異，并且與健康狀況密切相關(guān)。健康蝦類腸道內(nèi)細(xì)菌數(shù)量最高，其次是胃、肝胰腺，細(xì)菌數(shù)量最少的是肌肉，因此對(duì)消化道內(nèi)菌群區(qū)系的研究也多集中在腸道。分析胃、腸內(nèi)細(xì)菌數(shù)量高的原因: 一方面可能是蝦類胃腸與外界水環(huán)境相通，在攝食的過程中細(xì)菌容易進(jìn)入腸胃；另一方面，胃腸結(jié)構(gòu)利于細(xì)菌的定殖，尤其是腸腔內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定且營(yíng)養(yǎng)豐富。肝胰臟是病原菌侵襲的主要器官[28- 29]，因此蝦類發(fā)病時(shí)肝胰臟中的病原菌會(huì)大量增殖，表現(xiàn)出病理癥狀。Eduardo等[30]比較了健康的和爆發(fā)發(fā)光弧菌疾病的斑節(jié)對(duì)蝦肝胰臟中發(fā)光弧菌的數(shù)量及其占弧菌總數(shù)的比例，爆發(fā)疾病的蝦中發(fā)光弧菌的數(shù)量比健康的蝦高3~8倍，而且弧菌種類較為單一，發(fā)光弧菌約占弧菌總數(shù)的90%，而健康的蝦中發(fā)光弧菌僅占弧菌總數(shù)的50%。病原菌在肝胰臟中增殖最終控制整個(gè)消化道，取代對(duì)宿主有益的正常菌群[8]，致使宿主因消化道微生態(tài)失衡而發(fā)病[31]。李繼秋等[32]對(duì)從同一對(duì)蝦養(yǎng)殖池中采集到的感染白斑綜合征病毒(WSSV) 的對(duì)蝦和未感染WSSV 的對(duì)蝦腸道微生物區(qū)系進(jìn)行了比較研究，感染WSSV 的對(duì)蝦腸道菌群數(shù)量增加，尤其條件致病菌增多。可見，正常菌群的失衡會(huì)引起不同類型的疾病；反之，不同類型的疾病也有可能造成正常菌群的失衡。

3. 2 外界條件影響因素

蝦類由于是變溫動(dòng)物，其體內(nèi)菌群容易隨外界溫度變化而發(fā)生改變[2]。許多研究者研究了溫度對(duì)蝦類體內(nèi)菌群的影響[33- 34]。尹軍霞等[34]研究了水溫對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道菌群的影響，厭氧菌總數(shù)、雙歧桿菌隨水溫升高顯著增加，好氧菌總數(shù)、乳酸桿菌隨水溫升高變化不顯著。隨著水溫升高，腸道厭氧菌的優(yōu)勢(shì)越明顯。Scott等[33]報(bào)道了溫度升高( 28℃以上) 和低溶解氧條件下擬態(tài)弧菌和霍亂弧菌會(huì)在體內(nèi)增殖，引起小龍蝦發(fā)病。不同細(xì)菌對(duì)溫度的喜好性是有差異的，溫度的改變會(huì)直接影響腸道菌群的數(shù)量與組成；同時(shí)，溫度的變化也會(huì)影響水體的其它理化因子以及對(duì)蝦的生理代謝活動(dòng)，改變細(xì)菌的生活環(huán)境，從而間接影響細(xì)菌。

細(xì)菌對(duì)鹽度具有一定的適應(yīng)性，鹽度變化必然引起水體菌群的改變，進(jìn)而影響蝦類消化道菌群的組成。許多研究發(fā)現(xiàn)弧菌和假單胞菌為海水蝦類體內(nèi)的常見菌，而氣單胞菌、鄰單胞菌和腸桿菌則為淡水生物體內(nèi)的常見種[7，。Sugita等[36]報(bào)道用海水馴化廣鹽性的淡水長(zhǎng)臂蝦時(shí)，消化道好氧菌群隨鹽度變化的情況。當(dāng)養(yǎng)殖水中添加50%海水時(shí)，水體和消化道中優(yōu)勢(shì)細(xì)菌包括假單胞菌，弧菌-氣單胞菌，不動(dòng)桿菌，拉莫氏菌和腸桿菌；當(dāng)養(yǎng)殖水中海水達(dá)到100%時(shí)，腸桿菌成為消化道優(yōu)勢(shì)菌，假單胞菌成為水體優(yōu)勢(shì)菌；當(dāng)養(yǎng)殖水重新改為自來水時(shí)，對(duì)蝦消化道內(nèi)菌群也恢復(fù)到原來淡水時(shí)的狀況。

提及藥物對(duì)菌群的影響，首先會(huì)想到抗生素。抗生素及化學(xué)類藥物在治療細(xì)菌性疾病方面起著重要的作用，但是由于抗生素的抗菌譜的差異以及耐藥菌株的出現(xiàn)，細(xì)菌對(duì)不同的抗生素的敏感性具有一定的差異。Otta等[37]在印度對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦幼體的消化道菌群組成以及耐藥性進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)超過90%的細(xì)菌對(duì)阿莫西林、安西林、頭孢氨芐、頭孢唑林、氨唑西林、磺胺苯比唑等產(chǎn)生耐藥性，而大部分的細(xì)菌對(duì)四環(huán)素、氯霉素、諾氟沙星、環(huán)丙沙星等比較敏感。抗生素及化學(xué)藥物在殺滅病原菌的同時(shí)，也會(huì)直接破壞正常的菌群組成[38]。而中草藥來源于天然植物，成分復(fù)雜，具有多種藥理效應(yīng)，經(jīng)口服進(jìn)入消化道后，同位于消化道內(nèi)的菌群接觸，影響菌群的狀態(tài)。研究表明，中藥不僅能夠殺滅病原菌，而且能夠有效地調(diào)節(jié)患病個(gè)體的微生態(tài)平衡[39，。

有益菌具有抑制病原菌，提高機(jī)體免疫，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)等多重作用[41]，其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用表明人們已經(jīng)開始定向的調(diào)控改善消化道菌群。Jayasree等[42]對(duì)患病的斑節(jié)對(duì)蝦體內(nèi)細(xì)菌及其藥敏性進(jìn)行調(diào)查研究，發(fā)現(xiàn)許多弧菌對(duì)多種抗生素產(chǎn)生了耐藥性，因此提出在養(yǎng)殖中使用有益菌進(jìn)行病害防治已刻不容緩。有益菌進(jìn)入體內(nèi)后，黏附于消化道粘膜上，成為消化道菌群的一部分，進(jìn)而影響宿主體內(nèi)的原有菌群[43]。有益菌的作用方式包括通過競(jìng)爭(zhēng)黏附位點(diǎn)，分泌抗菌物質(zhì)，競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)因子等[44- 45]。Venkat等[46]在仔蝦階段的餌料中添加乳酸桿菌，可以抑制體內(nèi)的革蘭氏陰性菌。Vijayan等[46]分離到一株具有較強(qiáng)抗菌能力的假單胞菌PS-102，用112株對(duì)蝦病原菌與其進(jìn)行抗菌試驗(yàn)，結(jié)果表明該菌的無細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)73%的病原菌具有抑制作用，所分泌的抗菌物質(zhì)非常穩(wěn)定，可以耐受蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的分解，而且感染實(shí)驗(yàn)表明該株細(xì)菌對(duì)哺乳動(dòng)物和對(duì)蝦均無毒性。

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2012-8-23 15:28
4 小結(jié)
總體來說，人們對(duì)蝦類消化道菌群的研究尚處于初級(jí)階段，許多研究結(jié)果還不夠系統(tǒng)完善。今后應(yīng)進(jìn)一步做好如下方面的研究：菌群在體內(nèi)定植、演替的機(jī)制；環(huán)境因子對(duì)菌群組成的影響；外源添加物如有益菌、中草藥、寡糖等對(duì)菌群的影響；正常菌群與宿主之間的關(guān)系及其作用。通過以上幾方面的研究，為合理調(diào)控消化道菌群提供理論基礎(chǔ)，促進(jìn)宿主蝦類的健康生長(zhǎng)。

作者: thiefchen 時(shí)間: 2012-9-8 20:23
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作者: apple 時(shí)間: 2014-10-22 11:17
謝謝分享，學(xué)習(xí)！

作者: cjlittlepig 時(shí)間: 2014-10-23 08:37

apple 發(fā)表于 2014-10-22 11:17
謝謝分享，學(xué)習(xí)！

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